| Auteur(s) | Danglot L., Bessis A. & Triller A. |
| Adresse(s) | Biol. Cell. Synapse, ENS Paris |
| Titre | Association extrasynaptique des récepteurs GABAA et de la géphyrine au cours de la synaptogenèse dans les neurones d'hippocampe en culture. |
| Texte | Les cultures de neurones d'hippocampes se composent principalement de neurones pyramidaux glutamatergiques et d'interneurones gabaergiques. Alors que la synaptogenèse excitatrice a été largement analysée, la synaptogenèse inhibitrice reste encore mal connue. L'expression de récepteurs GABAA (RGABAA) extrasynaptiques a déjà été mise en évidence, mais l'évolution de cette expression et l'association de ces récepteurs avec la géphyrine n'ont pas encore été décrites au cours du développement. Pour identifier la séquence d'évènements menant à l'établissement des synapses inhibitrices, nous avons suivi par immunohistochimie l'expression et la localisation cellulaire de la synapsine, VIAAT, GAD 65, la géphyrine et du RGABAA après 3 à 21 jours en culture (DIV). VIAAT et GAD-65 étaient détectés au niveau des boutons après 10 DIV, soit 3 à 7 jours après la différenciation des terminaisons glutamatergiques. Au niveau postsynaptique, nous confirmons la présence de RGABAA extrasynaptiques. Les sous-unités RGABAA b2/3 et g2 ont des profils d'expression différents. Nous avons comparé ces profils d'expression à celui de la géphyrine par double et triple marquages. La sous-unité RGABAA-b3 est exprimée de manière diffuse, puis en amas lors de la différentiation des terminaisons gabaergiques. La colocalisation avec la géphyrine est déjà forte aux stades précoces (63% à 10 DIV) et continue d'augmenter durant le développement (86% à 21 DIV). Après 21 DIV, les RGABAA-b3 associés à la géphyrine sont toujours détectés aux sites extrasynaptiques (19%). A 10 jours, les RGABAA-g2 forment des clusters : extrasynaptiques (69%) et synaptiques (31%) associés (48, 1%) ou non (51, 9%) à la géphyrine. Progressivement, les sous-unités RGABAA-g2 s'associent à la géphyrine pour atteindre 92% à 21 DIV, (dont 87% synaptiques). Nos données indiquent que l'association RGABA-géphyrine varie au cours de la synaptogenèse, et que la formation des clusters de RGABAA-g2 est indépendante de la géphyrine. |